KB染色で検索する中枢神経系の病理構造は、神経細胞のニッスル小体の病変や髄鞘の病変などがある。アクロマジアなどニッスル小体の病変はHEで識別できるがKBのほうが見やすい。髄鞘そのものの病理変化はHEで観察は難しいため、KBで確認する必要がある。 一般染色：組織の成り立ちを概観する ヘマトキシリン・エオジン（he）染色 細胞核と細胞形質を違った2種類の色調に染め分ける 特殊染色：ある特定の組織成分のみ選択的に染める クリューバー・バレラ（kb）染色 ニッスル小体と髄鞘を染める ボディアン染色

染色液のpHの値によって染まり方が異なる。pHの値が3.0近辺では、ニッスル小体、核小体、核膜のみが淡青色に染まる。グリア細胞の核はうっすら染まる程度である。 KB染色はHE染色と違い髄鞘を可視化できることが特徴である。またニッスル小体をより明瞭に識別できる。リポフスチンは青黒く見える。 1．ニッスル小体（リボゾーム、粗面小胞体） ・ニッスル染色（トルイジン青、チオニン、クレシル紫） 2．神経原線維 ・ボディアンの鍍銀法 プロテイン銀 ⇒ 軸索、原線維 . ボディアン染色（Bodian染色） 4. 各種特殊染色 染色液のpHの値によって染まり方が異なる。pHの値が3.0近辺では、ニッスル小体、核小体、核膜のみが淡青色に染まる。グリア細胞の核はうっすら染まる程度である。pHの値が高くなるにつれて全体的に色が濃くなり、神経細胞の細胞形質、神経線維、グリア細胞などが共染するようになる。pH4.0近辺では共染が強くなるため、分別にかかる時間が長くなる。 3．髄鞘、ニッスル小体 ・クリューババレラ染色 1. この画像はニッスル染色された齧歯類海馬の組織断片である。 様々な分類の細胞が見える。 神経細胞の基本的な機能は、神経細胞へ入力刺激が入ってきた場合に、 活動電位 を発生させ、他の細胞に情報を伝達することである。 ニッスル：Nissl染色。よくNissleと間違えるので注意。神経系の基本染色の一つで、主にニューロンを染める。核酸を青く染める。「ニッスル染 色」とは、実際にはcresyl violetとか、thioninなどの染色試薬を使った染色の総称である。 kb染色で検索する中枢神経系の病理構造は、神経細胞のニッスル小体の病変や髄鞘の病変などがある。アクロマジアなどニッスル小体の病変はheで識別できるがkbのほうが見やすい。髄鞘そのものの病理変化はheで観察は難しいため、kbで確認する必要がある。 このように、組織はhe染色によって好塩基性と好酸性に染め分けることができる。 写真の中で、各構造物の名称を好塩基性は青に好酸性はオレンジに色分けして示す。リポフスチンは特に好塩基性でも好酸性でもないため色分けしない。 he染色法でみる中枢神経系の構造. ニッスル染色は神経細胞の胞体内に存在する塩基性好性物質（ニッスル 小体）を染色する方法で、神経細胞のみを明瞭に染め出すので、神経細胞 の形態や配列を検索するのに不可欠の方法である。しかし神 … 核およびニッスル小体（粗面小胞体）をクレシルバイオレットで青紫色に染める。クリューバー・バレラ染色（KB染色）に用いられる。染色液のpHの値によって染まり方が異なる。pHの値が3.0近辺では、ニッスル小体、核小体、核膜のみが淡青色に染まる。グリア細胞の核はうっすら染まる程度である。pHの値が高くなるにつれて全体的に色が濃くなり、神経細胞の細胞形質、神経線維、グリア細胞などが共染するようになる。pH4.0近辺では共染が強くなるため、分別にかかる時間が長くなる。現在、神経病理解析室で使用しているクレシルバイオレットは以下の３つ。製品によって染色液のpHが異なるため染まり方が異なる。したがって、分別にかかる時間がそれぞれの製品によって異なるため注意が必要。しかし、どの製品を使用しても、鏡検しながら分別をすることで最終的に得られる染色像を同じにすることができる。※ SIGMA社とMERCK社の染色液に10%酢酸を適量加え、pHを3.5から3.8程度に調整することによって、95%エタノール分別にかかる時間を短くすることが可能。しかし、酢酸を加えた染色液は再利用しない。背景が白くなるまで分別する。また神経細胞の核は、核小体および核膜が明瞭で染色質の色が薄く染まるのが理想。SIGMA, Cresyl Violet acetate（pH4.7）使用写真左）95%エタノール分別、10秒のみ：分別が不十分だと神経細胞全体がべったり青く染まっているため、核、ニッスル小体を識別できない。写真右）95%エタノール分別、10分間：分別を十分に行うことにより、神経細胞の核、ニッスル小体がはっきりと区別できるようになる。 ガリアス染色（Gallyas染色） 5. ニッスル顆粒（ニッスル小体） 細胞内に存在する塩基性顆粒で、電顕的には、粗面小胞体と遊離リボゾームの集合体であり、ここで蛋白質合成が盛んに行われている．この顆粒の変化により、神経細胞の活動の程度を定することができる。 クリューバー・バレラ染色（Klüver-Barrera染色; KB染色） 3. 髄鞘の発達の様子は髄鞘染色で確認できる。髄鞘の発達は胎児期から大人になるまで続く。特に生後２年までの間に劇的に髄鞘化が進む。 公益財団法人東京都医学総合研究所 神経病理解析室 関 絵里香KB染色はHE染色と違い髄鞘を可視化できることが特徴である。またニッスル小体をより明瞭に識別できる。リポフスチンは青黒く見える。 代表的４染色による神経細胞、グリア細胞の実際の見え方を示す。神経細胞は形・大きさで識別は容易である。オリゴデンドログリアの核はリンパ球様の小さく濃染し、アストロサイトの核は比較的大きく明るいので識別できる。ボディアン染色では神経突起が染まり、KB染色（LFB染色）では神経突起の周囲の髄鞘が染色される。ホルツァー染色は正常組織では染まらない。 ほとんどの正常・異常構造物はHE染色で観察することが可能であるが、鑑別診断に重要な構造物の一部は可視化できないので（下表参照）、他の特殊染色・免疫染色を要することに留意する。ヘマトキシリン液（カラッチ、マイヤー）によって好塩基性の様子は若干異なる。KB染色は、ニッスル（Nissl）染色のクレシルバイオレットと、ルクソールファストブルー（Luxol fast blue）の２重染色。クレシルバイオレットは粗面小胞体（ニッスル小体）を青紫色に染める。ルクソールファストブルーは髄鞘を青色に染める。ルーペ像では、灰白質は薄く濁った青色に染まる。白質は鮮やかな青色に染まり、白質の脱落病変を検出することが容易となる。ボディアン染色は使用する試薬が製造・販売中止なので、できなくなる日がやがて来るので、今後の対策を考えておく必要がある。メセナミン銀染色、ビルショウスキー平野変法、ホームズなどがあり、染色性が異なる。ボディアン染色をはじめとする銀染色では、神経突起（軸索、樹状突起）の脱落、腫大性変化や発芽現象などが観察できるほか、線維成分の凝集体を検出することができる。銀染色の陽性像は、染めている構造の線維成分の密度により加減される。一般的に、ニューロフィラメントやpaired helical filamentのような構造が凝集したものが、より濃く染まる。ガリアスも銀染色であるが、正常成分は染色せず、リン酸化タウの細胞内蓄積物質を黒く染める。一方、αシヌクレインが主たる構成成分である、多系統萎縮症（multiple sysytem atrophy）に特異的な構造物のグリア細胞質封入体（glial cytoplasmic inclusion）も明瞭に染める。ただし、αシヌクレインが構成蛋白であるレヴィ小体、レヴィ関連ニューライトは染めない（極めて薄い黒色を呈するが、この染色の陽性像とは位置づけない）。ホルツァー染色はアストロサイトの突起内の線維成分を青紫色に染色する。正常アストロサイトでも突起内の線維成分が多ければ染めるが、一般的な用途は病変が古くなった際に形成される“瘢痕化”であるグリオーシスを染色する（下表の1）、2)）。その他、神経皮膚症候群である結節性硬化症では皮質結節がグリオーシスを形成する（下表の3））。また、髄鞘の脱落がないにもかかわらず、グリオーシスが高度に形成されている状態をDissociation gliomyeliniqueと言う（下表の4））。形成機序は不明である。一方、これらグリオーシスの他、アストロサイトのfootに溜まるポリグルコサン小体である類でんぷん小体を明瞭に染めるが、本来の目的ではない副次的な染色像である。ホルツァー染色では行程中に有害ガスが発生するためドラフト内で行う。グリオーシスを染色する代替えの染色としては、リンタングステン酸ヘマトキシリン染色（PTAH染色）があるが、あまり有用ではない。

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